在細胞體外培養(yǎng)工作中，為了達到長期保存細胞的生物活性的目的，須將細胞進行冷凍保存，并在實驗需要的時候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前，細胞凍存最-常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護劑使細胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達保護細胞的目的。

普諾賽即用型無血清非程序凍存液是普諾賽技術(shù)團隊在長期的細胞研究過程中針對細胞的凍存和復(fù)蘇不斷優(yōu)化實驗條件，面向數(shù)百種細胞研發(fā)出的專用凍存液產(chǎn)品。 

無血清非程序凍存液添加了細胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓，影響細胞凍存效果。另外，添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內(nèi)保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，能大大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動物源性蛋白，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全；不僅適用于常規(guī)細胞系、原代細胞，同時亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。 

與傳統(tǒng)凍存液相比，無需繁瑣費時的程序凍存步驟或價格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細胞后置于-80℃超低溫冰箱，長期冷凍保存。如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

無血清非程序凍存液產(chǎn)品特點

1、即用型細胞凍存液，隨用隨取，2-8℃穩(wěn)定保存1年以上；

2、無需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀，直接放入-80℃冰箱，節(jié)省大量的時間和精力；

3、細胞復(fù)蘇率高達90%以上，適用于大多數(shù)哺乳動物細胞的凍存；

4、不含血清，批次間差異??；

5、能夠有效維持干細胞的多向分化潛能；

6、化學(xué)成分明確，沒有添加任何外源蛋白，減少細胞污染機會，同時減少外源蛋白對細胞正常生長和分化的影響。

無血清非程序凍存液使用說明

(一)細胞凍存

1、選擇對數(shù)生長期的細胞（90%左右），并保證在凍存前24 h內(nèi)換液一次，收集細胞，并將細胞制備成單細胞懸液（貼壁細胞可能需要用胰酶消化），計數(shù)；

2、將細胞懸液1000 r/min 離心5 min，棄上清；

3、向細胞沉淀物中加入細胞凍存液，輕輕吹打，重懸細胞，使細胞密度達到5×10?-1×10?個/mL；

4、將上述細胞懸液按0.5 mL或1.0 mL的量，分裝于無菌細胞凍存管內(nèi)，擰緊管蓋，并做好標記；

5、直接將分裝好的細胞凍存管直接置于-80℃超低溫冰箱中，可長期冷凍保存。

6、如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

(二)細胞復(fù)蘇

1、從液氮罐中取出凍存的細胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時切勿使水浸沒凍存管口，以免造成細胞污染)；

2、待細胞凍存管中凍存液完-全融化后，立即逐滴加入少量細胞完-全培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞進行混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有8-10 mL該細胞完-全培養(yǎng)基的試管中，輕輕混合均勻；1000 r/min離心5 min，棄上清；

3、加入1-2 mL完-全培養(yǎng)基重懸細胞，按照合適的接種密度將細胞接種到細胞培養(yǎng)容器中，加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細胞完-全培養(yǎng)基；

4、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿，使細胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

無血清非程序凍存液穩(wěn)定性及保存條件

1、置于2-8℃避光保存，有效期為1年；

2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過保質(zhì)期，必須放棄使用；

3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。

無血清非程序凍存液注意事項

1、凍存細胞分裝至凍存管后，應(yīng)減少在室溫/4℃存放時間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

2、對于原代胚胎干細胞/iPS細胞/其它珍貴細胞樣本等凍存時，我們建議您在使用前，事先對所凍存的細胞進行至少為期1周的細胞凍存測試實驗，確認沒問題后再進行正式凍存；

3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22 μm過濾除菌，使用本產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染；

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作；

5、本產(chǎn)品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。

無血清非程序凍存液文獻列表

• Aβ1-42 promotes microglial activation and apoptosis in the progression of AD by binding to TLR4 (2024-11-14)

  期刊：Redox Biology

  DOI：10.1016/j.redox.2024.103428

  影響因子 ：10.7

  引用產(chǎn)品： 通用血清型程序凍存液 ,  BV2 (DMEM) 細胞

• Impact of manufacturing processes on glycerolipid and polar lipid composition and ultrastructure in infant formula (2024-02-01)

  期刊：FOOD CHEMISTRY

  DOI：10.1016/j.foodchem.2024.138623

  影響因子 ：8.5

  引用產(chǎn)品： 無血清非程序凍存液